DNase I (RNase free)

For in vitro use only!

Unit Definition: 1 Kunitz unitは、高重合度DNAの25℃における260nmの吸光度の増加0.001/min/mlを生じるのに必要な酵素量と定義される。

出荷:ブルーアイスで出荷

保存条件:-20℃で保存
凍結融解サイクルは避ける

保存期間:12ヶ月

形態:液体(10 mM Tris-HCl pH 7.で提供されます。5、10 mM CaCl2、10 mM MgCl2および50 %グリセロールで供給)

濃度:2単位/μl

用途:
DNase Iは一般的に細胞溶解試薬に加えられ、バクテリア細胞溶解液中のDNA含有による粘度を除去したり、体外転写によって生成したRNAからDNAテンプレートを削除するために使用されます。
DNase Iは、細胞溶解液から不要なDNAを除去し、タンパク質の抽出効率を高めます。

DNase I (RNase free), Deoxyribonuclease Iは、一本および二本鎖のDNAを分解するグリコシル化ポリペプチドである。 DNAを5’ホスホジヌクレオチドと小さなオリゴヌクレオチド断片に切断することにより作用します。
DNase Iは、RNAへの損傷を避けることが重要な、DNAの消化を要するアプリケーションに使用されます。

反応条件
1x DNase I Reaction Buffer
Incubation at 37°C

10x DNase I Reaction Buffer:
100 mM Tris-HCl pH 7.6 (25°C)
25 mM MgCl2
5 mM CaCl2

不活化:
DNase Iは65℃、10分加熱で不活性化されます。 Na+やK+のような高濃度の一価イオン(すなわち100mM)はDNase I活性を低下させる。

活性:
> 2500単位/mgタンパク質

DNase I活性は、10mM Tris-HCl pH7で37℃、10分間で1μgのプラスミドDNAを完全に分解するに要する酵素量と定義される「分解測定単位」でも測定される。5、50 mM MgCl2および13 mM CaCl2中、37℃で10分間に1 μgのプラスミドDNAを完全に分解するのに必要な酵素量として定義されます。
1 ‘Degradation Assay unit’ is equivalent to 0.3 ‘Kunitz units’.

製品引用:
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選択した参考文献:
Sambrookら(1989)Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd ed. New York: Cold Spring Harbor Laboratory Press 10.6
Tabor et al. (1997) DNA-Dependent DNA Polymerases. In: カレント・プロトコール・イン・モレキュラー・バイオロジー。 Ausubelら、編。 ワイリー&サンズインコーポレイテッド. 3.5.4-6.
Pan et al. (1999) Ca2+- dependent activity of human DNase I and its hyperactive variants.「ヒトDNase IのCa2+依存性活性とその高活性バリアント」。 Protein Sci. 8:1780..

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