Detta är ett preparat av Bacillus subtilis, färgat för att visa endosporer. Efter tillväxt på näringsagar vid 37 grader Celsius i 24 timmar avlägsnades organismerna från plattan och suspenderades i en droppe vatten på ett glasobjektiv. Vattnet fick lufttorka och sedan värmebehandlades bakterierna till objektglaset genom att det passerade genom lågan på en Bunsenbrännare 3-4 gånger. Objektglaset fick svalna. Endosporerna färgades med 5 procent malakitgrönt genom att glaset översvämmades med färgämnet och en låga placerades under glaset tills färglösningen började producera ånga. Den uppvärmda malakitgröna lösningen lämnades på cellerna i 5 minuter. Det var inte nödvändigt att kontinuerligt ånga (värma) objektglaset. Objektglaset sköljdes med kranvatten och cellerna kontrafärgades i 30 sekunder med 0,25 procent Safranin O (samma kontrafärgning som används vid Gram-reaktionen). Om endosporerna inte är gröna efter färgningsproceduren kan det vara nödvändigt att ändra tekniken så att den innefattar kontinuerlig ångning med malakitgrönt i 5 minuter. Den genomsnittliga cellstorleken var 3-5 mikrometer.