17.4 Assessment
ストレス、栄養、毒物などの環境要因、あるいは生活史上の出来事(脱皮、移動、繁殖など)による免疫力の変化を評価するには、感染症や新生物に対する「現実の」防御効果を予測できる系統だったアプローチが必要である。 1078>
毒物による免疫抑制を評価するための標準的な測定パネルが開発されている。 しかし、このパネルは、ストレス、栄養、生活史的イベントによるものなど、より生理的な免疫調節との関連性については検証されていない。 免疫毒性学の広範な研究により、感染症や腫瘍性疾患を阻止するための免疫システムの有効性 を予測するためには、高度な定量的評価法が必要であり、単一の免疫機能評価法で十分なもの はないことが示されている。 イムノトックスパネルには、一般的な健康状態(体重、食物摂取量、白血球数など)、一次・二次免疫臓器の重量と病理組織学、抗原に対する免疫反応の機能的アッセイなどが含まれます。 免疫の主要部門の発現に関与する細胞および制御プロセスを統合した機能的アッセイ は、当初、最も有益であった。 一旦、免疫系の全体像がつかめれば、責任のある特定のメカニズムを解明するための直接的な研究が可能となる。 基準化合物(例えば、アザチオプリン、デキサメタゾン、シクロホスファミド、シクロスポリンA)や栄養素を用いることも、試験法間、実験室間、種間比較のために重要である。 免疫機能の変化は、白血球が曝されるホルモン、栄養、物理的環境の変化の結果であることが多いため、当初は in vivo 試験法が最も適している。 さらに、栄養素や毒物、ホルモンの影響は直線的ではなく、二相性であることが多いので、用量反応曲線が重要である。 免疫防御を調べるために弱毒化ワクチンを使用することは、解釈の問題をはらんでいる。 反応が大きいのは、チャレンジドーズに対する反応能力が高いからかもしれない。 あるいは、動物の免疫力が十分に低いために、チャレンジ用量が急速に複製され、より大きく持続的なチャレンジを提供し、その結果、より持続的で活発な反応を必要とするためである可能性もある。 栄養学的な免疫調節が免疫反応に及ぼす影響は、ワクチンが生消化物か殺生物かによって大きく異なることが珍しくありません。 1078>
In vivoでの細胞媒介(Th1)反応のテストは重要であり、免疫毒性学では回収抗原に対する遅延型過敏症(DTH)反応が採用されてきた。 鳥類の免疫学では、レクチンのPHAを翅や足趾に注射して、その腫れの量を測定することでこの目的に使用されることがある。 しかし、この腫れは炎症とリンパ球の浸潤の両方によるものであるため、PHAを使用することは解釈の問題をはらんでいる。 1078>
in vivo実験の結果は、希釈した全血のex vivo培養でさらに検討することができる場合がある。 全血は生体内で見られる栄養やホルモン環境の多くを保持しているが、白血球を精製した後、外国の血清を含む一般培地で培養すると、しばしば免疫の変化を引き起こす多くの重要な制御因子が取り除かれる。 Ex vivo実験では、循環ストレスホルモンの変化に非常に敏感である。 例えば、わずか30分の急性ストレスによる免疫抑制効果は、全血による大腸菌の殺傷能力で明らかである
感染性生物によるチャレンジに対する宿主の抵抗性は、免疫調節の最終評価にとって重要である 。 残念ながら、この重要なステップは、費用がかかるため、ほとんど行われていない。 免疫抑制と免疫調節を区別するために、防御を定量化する場合、Th1、Th2および炎症性免疫反応を調べる挑戦的な生物を使用する必要がある。 げっ歯類を用いた免疫毒性試験において、免疫応答の指標に中程度の変化をもたらす化合物 が、必ずしも本物の病原体に対する抵抗性の変化につながるとは限らない。 これは、免疫エフェクター系がかなり冗長であり、重複しているためと思われる。 逆に、免疫の機能テストに変化の証拠がない化合物は、病原体や腫瘍に対する抵抗性に影響を与えないと思われる。 発育途上の免疫系は成体のそれよりも毒物に対して敏感であり、この状況は一般に栄養不足にも当てはまると考えられているが、鳥類におけるこの比較に焦点を当てた研究はほとんどない。 毒物については、発育期の暴露によって、定量的効果(最低有効量や用量反応曲線)だけでなく、定性的効果(すなわち、異なる免疫パラメータが影響を受ける)も異なる可能性があります。 また、発生期の傷害はより持続的な影響を与え、時には生涯にわたって免疫抑制を引き起こすこともある。
自由行動下の鳥類における免疫研究は、個体を捕獲・再捕捉することの難しさ、捕獲後のストレスによるアーチファクト、試薬の種特異性、そしてほとんどの自由行動下の鳥類の小ささから、多くの制限がある(22章参照)。 自由行動する鳥を飼育することは、ストレスや不適切な食事や飼 育など、多くのプレッシャーを与えることになる。 15-30分の捕獲ストレスでさえ、自然免疫の指標に影響を与え、結果の解釈を混乱させる可能性がある。 したがって、捕獲後速やかに鳥のサンプルを採取し、1回の血液サンプルでアッセイを実施することが望ましい
。