Spore Stain of Bacillus subtilis

Ez egy Bacillus subtilis preparátum, amelyet az endospórák kimutatására festettek meg. Miután 24 órán át 37 Celsius-fokon Nutrient agaron növekedtek, az organizmusokat eltávolítottuk a lemezről, és egy csepp vízben szuszpendáltuk egy üveglemezre. A vizet hagytuk a levegőn megszáradni, majd a baktériumokat hővel rögzítettük a tárgylemezre úgy, hogy 3-4 alkalommal egy Bunsen-égő lángján keresztülvezettük a tárgylemezt. A tárgylemezt hagytuk kihűlni. Az endospórákat 5 százalékos malachit-zölddel festettük meg úgy, hogy a tárgylemezt elárasztottuk a festékkel, és lángot helyeztünk a tárgylemez alá, amíg a festékoldat gőzölögni nem kezdett. A felmelegített malachitzöld oldatot 5 percig hagytuk a sejteken. A tárgylemez folyamatos gőzölése (melegítése) nem volt szükséges. A tárgylemezt csapvízzel leöblítettük, majd a sejteket 30 másodpercig ellenfestettük 0,25 százalékos Safranin O-val (ugyanazzal az ellenfestékkel, amelyet a Gram-reakcióban használtunk). A festési eljárás befejezése után, ha az endospórák nem zöldek, a technika módosítására lehet szükség, amely magában foglalja a malachit-zölddel való folyamatos gőzölést 5 percen keresztül. Az átlagos sejtméret 3-5 mikrométer volt.

Vélemény, hozzászólás?

Az e-mail-címet nem tesszük közzé.