Biol Res 41: 197-204, 2008
ARTICLE
Differences in lipogenesis and lipolysis in obese and non-obese adult human adipocytes
MARIANA CIFUENTES, CECILIA ALBALA and CECILIA V ROJAS
Institute of Nutrition and Food Technology (INTA), Universidad de Chile, Santiago, Chile.
Dirección para Correspondencia
ABSTRACT
Az a javaslat született, hogy az elhízott és sovány individuáisok közötti különbségek a zsírsejtek működésében és/vagy anyagcseréjében funkcionális zsírszöveti rendellenességekben nyilvánulhatnak meg, amelyek elhízás esetén metabolikus zavarokhoz vezetnek. Elhízott (OB) és nem elhízott (NOB) emberekből származó omentális adipociták lipogenezisét és lipolízisét vizsgáltuk. A lipogén marker enzim, a G3PDH specifikus aktivitása 50%-kal alacsonyabb volt az OB alanyok összes zsírsejtjében, mint a NOB alanyokéban. Az OB alanyok omentális adipocitáinak szintén alacsonyabb volt a bazális lipolitikus levéje, és alacsonyabb volt a p-adrenerg stimulusra adott lipolitikus válasz. Az adipociták plazmamembránjának koleszterincsökkentése metil β-ciklodextrinnel mindkét csoport adipocitáinál együttesen okozott lipolitikus hatást, de amikor az elhízott és sovány alanyokat külön-külön elemeztük, a válasz csak az elhízottaknál volt szignifikáns. Bizonyítékot mutatunk be egy eltérő lipogén és lipolitikus profilra az elhízott individuáis omentális adipocitáiban, és a plazmamembrán koleszterin releváns szerepét javasoljuk, ahol az OB és NOB adipocita lipolízisben való eltávolításának hatása eltérő.
Kulcsfogalmak: adipocita, koleszterin, lipogenezis, lipolízis, elhízás, triglicerid-anyagcsere.
BEVEZETÉS
A zsigeri zsírszövet feleslege számos egészségügyi problémához kapcsolódik. A megnövekedett adipozitás a zsírsejtek megnövekedett térfogatával jár együtt. Így az elhízott individuáisok viszonylag nagy mennyiségű hipertrófiás zsírsejtekkel rendelkeznek a sovány alanyokhoz képest. Állati és emberi zsírsejteken végzett vizsgálatok megállapították, hogy a nagyobb sejtmérettel a zsírsejtek számos metabolikus funkciója megváltozik, mint például az inzulinérzékenység és a glükóz anyagcsere, az adipokin szekréció és a génexpressziós profilok mellett (Bluher et al., 2004; Salans és Doherty, 1971; Salans et al., 1974; Smith, 1971; Yang et al., 2004). Ez ahhoz a feltételezéshez vezetett, hogy a zsírszövetben a hipertrófiás és/vagy metabolikusan károsodott sejtek funkcionális túlsúlya fontos okozója a szövet homeosztatikus szignáisokra adott alacsony válaszának, így állandósítva vagy súlyosbítva az elhízott állapotot. E hipotézis tesztelésére azt tűztük ki célul, hogy in vitro lipogenezist és lipolízist vizsgálunk OB és NOB felnőttek izolált omentális adipocitáiban. Tekintettel arra, hogy a lipolízis jelátvitel a caveolákban található fehérjéktől függ, és hogy e koleszterinben gazdag struktúrák szerveződésének megzavarása az elhízott adipociták metabolikus változásaival hozható összefüggésbe (Le Lay et al, 2004), a plazmamembrán koleszterin eltávolításának hatását is értékeltük metil (β-ciklodextrin (M(βCD) segítségével az OB és NOB adipociták lipolízisére.
A jelen eredmények aláhúzzák a sovány és elhízott alanyok eltérő lipogén és lipolitikus profilját. Adataink bizonyítják az elhízott alanyok adipocitáinak alacsonyabb plazmamembrán-koleszterintartalmának metabolikus jelentőségét, amely befolyásolja a lipolízis fiziológiai szabályozását.
MATERIALIS ÉS MÓDSZEREK
Adipociták izolálása
Az emberi omentális zsírt 25 elhízott (OB) és nem elhízott (NOB) alanyból nyertük, akik elektív hasi műtétnek (gyomor bypass, nőgyógyászati vagy gyomor-bélrendszeri) estek át. Az alanyok életkora 29-79 év között volt, testtömegindexük (BMI) pedig 18 és 54 kg/m2 között mozgott. Az elhízás meghatározásának határértékét az NIH meghatározása szerint a BMI > 30 kg/m2 volt. Tizenkét alany (9 férfi, 3 nő) volt NOB (BMI 23,3 ± 3,4 kg/m2), míg 13 volt OB (BMI 38,2 ± 4,3 kg/m2; 4 férfi, 9 nő). A vizsgált paraméterekben nem tapasztaltuk a nemek befolyását. A protokollt a Chilei Egyetem INTA intézményi felülvizsgálati bizottsága hagyta jóvá, és a donorok aláírták a beleegyező nyilatkozatot. A műtét során eltávolított zsírszövetet sóoldatba merítettük, és a laboratóriumba szállítottuk, ahol egy órán belül feldolgoztuk. A megérkezést követően a szövetet többször átmostuk Hanks kiegyensúlyozott sóoldattal (HBSS), eltávolítva minden látható kötőszövetet, vérrögöt és eret, majd apró darabokra (2-3 mm2 ) daráltuk, és MI99 (Invitrogen, Carlsbad, CA) médiumban, antibiotikumokkal (penicillin-streptomicin) kiegészítve 37°C-on, kontrollált atmoszférájú inkubátorban tenyésztettük. A szövetek inkubációs ideje 2 nap volt, hogy minimalizáljuk az alanyi tényezők, például a hormonális miliő, az aktuális egészségi állapot vagy a gyógyszerek által okozott interindividuális variabilitást. Az adipocitákat Rodbell (1964) munkáján alapuló módszerrel izoláltuk. Röviden, a darált zsírszövetet lg/1 I. típusú kollagenázzal (Worthington Biochemical Corp. Lakewood, NJ) inkubáltuk 37°C-on 60 percig folyamatos keverés mellett. Az így kapott sejtszuszpenziót steril gézlapon átszűrtük, és mivel az adipociták spontán elváltak a vizes fázistól, a lebegő réteget óvatosan, plastikpipettával szívtuk ki, majd kétszer 5 térfogat HBSS-szel mostuk. Az izolált adipocitákat vagy azonnal felhasználtuk a lipolízis vizsgálatokhoz, vagy lefagyasztottuk a későbbi glicerin-β-foszfát-dehidrogenáz (G3PDH) meghatározáshoz.
A lipolízisre való reagálás (β-adrenerg stimulusra és a lipogén aktivitás kimutatása (lásd alább) bizonyította az életképes adipociták jelenlétét a szövet emésztése után.
Lipogenezis és lipolízis
A trigliceridek szintézise az adipocitában mind előre gyártott, mind de novo gyártott zsírsavakat használ, míg a gliceringerinc glükózból származó glicerin-β-foszfátból származik. A lipogén kapacitást a G3PDH enzim specifikus aktivitásával vizsgálták, amely a trigliceridek gliceringerincének képződését katalizálja a glikolízis útján biztosított dihidroxiaceton-foszfátból. Ezt az enzimet a zsírszövetben a trigliceridszintézis sebességkorlátozójának tekintik, mivel ebben a szövetben ez a glicerin-β-foszfát szolé forrása. Lipogén markerként való használatát az érett zsírsejtekben alátámasztja mRNS-ének és aktivitásának inzulin hatására történő felszabályozása (Moustaid és mtsai., 1996; Rumberger és mtsai., 2003). Röviden, az izolált adipocitákat 4°C-on, 0,25 M szacharózt, lmM EDTA-t, 50 mM trietanolamint és lmM ditiotreitholt tartalmazó pufferben homogenizáltuk (10 ütés 1800 rpm-nél Glas-Col homogenizáló rendszerrel, Glas-Col, IN) egy teflonsütővel felszerelt üvegcső segítségével. A homogenátumot 14 000 x g-n, 4°C-on 30 percig centrifugáltuk. A G3PDH aktivitását a felülúszóban Kozak és Jensen (1974) módszere alapján határoztuk meg, a NADH oxidáció mérésével (az abszorbancia változásának időbeli alakulása 340 nm-en, 37°C-on) mikrolemez olvasón (EL-808, BioTek Instruments Inc, Winooski, VT), dihidroxiaceton-foszfátot használva az enzim szubsztrátjaként. A reakció lineáris volt az idő függvényében a vizsgálat időtartama alatt. Egy egységnyi enzimaktivitás 1 nmol NADH percenkénti oxidációjának felel meg a fenti körülmények között. Az oldható kivonat fehérjekoncentrációját a Bradford-módszerrel (Bradford, 1976) mértük.
A zsírbontást a 48 órás zsírtenyésztés során a MI99 tenyészmediumba felszabaduló kumulatív glicerin mérésével értékeltük (Free glycerol determination reagent, Sigma, St Louis MO). Ezenkívül a (β-adrenerg stimulusra adott akut lipolitikus választ, a plazmamembrán koleszterin kimerítésével vagy anélkül (60 perces előinkubáció 10 mM MβCD-vel ), a 10%-os adipocita szuszpenziók 90 perces inkubációja során 37°C-on, enyhe folyamatos kavargatással és 10μM izoproterenol (Sigma) vagy hordozó hozzáadásával felszabaduló összes glicerin mérésével értékeltük. A zsírszövetkultúra során végzett lipolízis értékeléséhez a glicerinértékeket mg szövetre vonatkoztatva fejezzük ki, míg az adipocita szuszpenziókban végzett lipolízisvizsgálathoz az értékeket a Carpéné (2001) által leírtak szerint az összes sejtlipidre, illetve a lipolitikus szerekkel végzett kísérletek esetén a megfelelő bázis (nem stimulált) kontrollra normalizáltuk. A teljes sejtlipideket Dolé és Meinertz (1960) módszerével extraháltuk, és gravimetrikusan határoztuk meg. Tekintettel a sejtméret és a lipolízis között jelentett független kapcsolatra, amely zavaró tényezőként működhet, különösen az OB és NOB alanyokat összehasonlító vizsgálatainkban, a mg lipidre vonatkoztatott kifejezést tartottuk a legmegfelelőbbnek. Amint Large és munkatársai (1999) kimutatták, a lipidtartalomra kifejezett glicerinreléáz magasan korrelál a hormonérzékeny lipáz aktivitásával elhízott és sovány emberi alanyokon végzett vizsgálatokban, és az elhízottakban megnövekedett zsírsejt-térfogat miatt relevánsabb a lipolitikus kapacitás szempontjából, mint a sejtszámra vonatkoztatva.
Statisztika
Az átlagok közötti különbségeket Student’s t-teszt segítségével elemeztük, és p≤0,05 esetén szignifikánsnak tekintettük. A Pearson-féle korrelációs együtthatót használtuk az összefüggések értékelésére a folytonos változók esetében. Az adatokat átlag ± SEM-ben fejeztük ki.
eredmények
Lipogenezis
A G3PDH lipogén enzim specifikus aktivitása közel fele volt az OB alanyokban a NOB-ból származó adipocitákéhoz képest (p<0,05, 1. ábra). Ezzel összhangban szignifikáns inverz korreláció volt a lipogenezis marker és az alanyok BMI-je között (1. ábra, betét, r2=0,31, p=0,01). Érdemes megjegyezni, hogy az OB és NOB alanyok között nem volt különbség a fehérjekoncentrációban (amelyet a G3PDH aktivitás normalizálására használtak), ami torzíthatta volna ezeket az eredményeket.
Lipolízis
A teljes omentális zsírszövet vagy izolált adipociták tenyésztése során a glicerin visszaalakítását az inkubációs médiumhoz a lipolitikus aktivitás mutatójaként használták. Mind a bazális, mind az izoproterenollal stimulált lipolízis alacsonyabb volt az OB alanyok izolált adipocitáiban (p<0,05 és p<0,01, illetve 2. ábra). E megfigyelésekkel összhangban a lipolízis és az alany BMI-je között rendkívül szignifikáns fordított korreláció volt a teljes szövet (r2=0,46, p<0,0005, betét, 2. ábra) és az izolált adipociták esetében (alap: r2=0,28, p<0,01; β-adrenerg stimulált: r2=0,17, p<0,05, n=20). Az elhízott személyekből származó adipociták alacsonyabb választ mutattak a (β-adrenerg stimulációra, mint sovány társaiké (3. ábra, p<0,05).
Az adipociták 10 mM MβCD-nek való kitétele 11 minta egy alcsoportjában szignifikáns növekedést okozott a bazális lipolízisben. Ez a növekedés egyenesen arányos volt az alany BMI-jével (r2=0,5, p<0,05, 4. ábra). A (β-adrenerg stimulációra adott lipolitikus válasz szignifikánsan csökkent, amikor az adipocitákat M(βCD-nek tették ki (345 ± 50 % vs. 199 ± 33 %, p< 0,05). Érdekes módon, amikor az M(βCD hatását összehasonlítottuk a hordozóval, az izoproterenolra adott lipolitikus válasz szignifikáns csökkenése volt megfigyelhető a BMI>40 kg/ m2 (kórosan elhízott, az NIH definíciója szerint) alanyoktól származó adipocitákban, míg a sovány alanyoknál nem volt szignifikáns különbség (5. ábra). Ezzel összhangban szignifikáns korrelációt találtunk a BMI és a 10μM izoproterenolra adott lipolitikus válasz aránya között 10 mM M(βCD jelenlétében és hiányában (r2=0,46, p<0,05).
DISZCUSSION
Jelen munkában OB és NOB felnőttek omentális zsírszövetéből izolált adipocitákban vizsgáltuk a lipogenezist és a lipolízist a BMI széles tartományában (18-54 kg/m2). Megfigyeléseink azt mutatják, hogy a lipogenezist jelölő G3PDH specifikus aktivitása az OB-ben feleakkora volt, mint NOB társaik adipocitáiban. Másrészt a magasabb BMI alacsonyabb bazális és (β-adrenerg stimulált lipolízissel, valamint a koleszterin eltávolítása miatti plazmamembrán jelátviteli károsodással szembeni nagyobb érzékenységgel járt együtt. A nagyobb triglicerid-felhalmozódás az OB adipocitákban összefügghet az alacsonyabb lipolitikus aktivitással, amelyet ebben a csoportban megfigyeltünk, ahogyan azt mások is javasolták (Langin és mtsai., 2005). Ezenkívül az általunk az OB-ban talált alacsonyabb G3PDH specifikus aktivitás, ami kontraintuitív eredményt eredményezhet, csökkent kapacitást jelenthet a felesleges keringő trigliceridek tárolására, ami valószínűleg hipertrigliceridémiát és zsírfelhalmozódást eredményez a test más régióiban, a metabolikus szindrómával kapcsolatos ismert káros hatásokkal.
Egy in vivo megközelítést alkalmazva embereken, Dodt és munkatársai (2003) elhízott nőknél tompított lipolitikus választ figyeltek meg az intraneurális stimulációra, ami összhangban van az in vitro eredményeinkkel, és alátámasztja azt az elképzelést, hogy az elhízás legalább részben összefügghet a szimpatikus aktivációra adott alacsony lipolitikus válasszal. Ezzel összhangban Gómez-Ambrosi és munkatársai (2004) az omentális zsírszövet génexpressziós mintázatát vizsgálták, és kimutatták, hogy az elhízott alanyoknál a lipolízist indukáló és represszor gének expressziója csökkent, illetve fokozott volt.
A szakirodalomban jelentős ellentmondás van a lipolízisadatok normalizálását illetően. Tekintettel az adipocitasejtek mérete és a lipolízis között jelentett közvetlen kapcsolatra (Large et al., 1999), valamint a nagyobb adipociták nagyobb relatív abundanciájára az elhízottaknál (Large et al., 1999), a zsírszövet várhatóan nagyobb kiigazítatlan lipolízist mutat az elhízottaknál, mint a NOB individuáisoknál. Ezért, hogy elkerüljük az OB és a NOB eltérő sejtméret-eloszlása miatti zavaró tényezőt, a glicerinreléase-értékeket normalizáltuk azáltal, hogy az összes lipid mg-jára vonatkoztatva fejeztük ki őket, így értékelve a lipolitikus aktivitást egy adott lipidtömegre vonatkozóan. Ezt alátámasztva elhízott és sovány embereken végzett vizsgálatok magas korrelációt figyeltek meg a kulcsfontosságú lipolitikus enzim HSL (hormonérzékeny Upase) és az adipocita glicerinreléáz lipidtartalomra kifejezett aktivitása között (Large et al., 1999). A szerzők megállapították, hogy a lipidtartalom fontosabb a lipolitikus kapacitás szempontjából, mint a sejtszámonkénti normalizálás, az elhízottakban megnövekedett zsírsejt-térfogat miatt. Érdemes megjegyezni, hogy (β-adrenerg stimuláció bazális körülmények felett szintén alacsonyabbnak bizonyult OB alanyokban, és ez az értékelés független a sejtek méretétől vagy számától, tekintve, hogy a megfelelő kontrollal (minden bazális valué) normalizálták.
A membrán koleszterintartalmának szerepét a caveolák integritásában, a specifikus jelátvitelben és a sejtek megfelelő működésében már felismerték (Le Lay és mtsi. 2001). Kimutatták, hogy a hipertrófiás zsírsejtek anyagcseréje károsodott, alacsonyabb plazmamembrán-koleszterintartalommal együtt (Le Lay et al. 2001). Megfigyeléseink kibővítik a Le Lay et al. (2001, 2004), akik kimutatták, hogy a koleszterincsökkentés a zsírsejtekben inzulinrezisztenciát és számos, a zsíranyagcsere szempontjából fontos gén expressziójának megváltozását idézi elő. Ezek az eredmények bizonyítékként szolgáltak arra, hogy a plazmamembránban lévő koleszterin csökkenése a zsírsejtek hipertrófiája és a metabolikus károsodás közötti kapcsolat, amit jelen eredményeink is alátámasztanak. Az adipocitákat M(βCD-nek kitevő kísérleteink a bazális lipolízis jelentős növekedését (a plazmamembrán caveolae integritásának megváltoztatása után várható, ami a foszfodiészteráz 3B aktivitás csökkenését eredményezte ) és következésképpen a (β-adrenerg stimulusra adott csökkent lipolitikus választ eredményezte. Érdekes módon szignifikáns összefüggést figyeltünk meg az M(βCD bazális lipolízisre gyakorolt hatása és a BMI között. Továbbá, a BMI és az izoproterenol és a bazális lipolízis aránya közötti szignifikáns korreláció M(βCD jelenlétében és hiányában alátámasztja az elhízott alanyokból származó adipociták nagyobb érzékenységét a koleszterincsökkentés által vezérelt plazmamembrán megváltozott jelátvitelére.
A megnagyobbodott zsírsejtek, amelyekről ismert, hogy az alanyok BMI-jének növekedésével gyakoribbak (Julien et al., 1989; Salans et al., 1973; Van Harmelen et al, 2003) inzulinrezisztensek (Olefsky, 1977), és sajátos szekréciós mintázatot mutatnak, ami összefüggésbe hozta őket az elhízással összefüggő rendellenességekkel (Imbeault et al., 1999; Van Harmelen et al., 2000).
Érdekes, hogy a zsírszövet-specifikus inzulinreceptor knockout egerek (Bluher et al, 2004) a zsírsejtek polarizációját mutatják két alpopulációra, kis (<50μm átmérőjű) és nagy >1OOμm) sejtekre, ami többek között a trigliceridszintézis és a lipolízis különbségeivel jár együtt. Az itt közölt megfigyelések a triglicerid-metabolizmusban az OB és NOB alanyok omentális adipocitái közötti intrinsikus különbségeket mutatják, és azt javasoljuk, hogy a hipertrófiás és membrán koleszterinhiányos adipociták dúsulása vezetheti ezeket a változásokat. Lehetséges, hogy a károsodott lipolitikus válasz idővel hozzájárul a trigliceriddepó megnagyobbodásához. A további trigliceridek tárolásának csökkent képessége a keringő lipidek megnövekedett mennyiségét eredményezné, növelve a metabolikus szindrómával kapcsolatos kockázatokat.
A legjobb tudomásunk szerint egyetlen más vizsgálat sem értékelte a lipogenezist és a lipolízist emberi OB és NOB alanyok omentális adipocitáiban. A jelen munka releváns különbségeket mutat az omentális adipociták triglicerid-metabolizmusában elhízott és nem elhízott alanyoknál, és arra utal, hogy az elhízott individuáis adipociták érzékenyebbek a plazmamembrán csökkent koleszterintartalmára. Bár célunk az alanyi tényezők minimalizálása volt, nem zárhatjuk ki, hogy az elhízott alanyoknál jelenlévő társbetegségek befolyásolhatják a zsírsejtek eltérő viselkedését. A trigliceridkezelés összehasonlítása e csoportok között és egy ilyen patogenetikai jelentőségű zsírdepóban segít megérteni az anyagcsere és a válaszkészség különbségeit, amelyek farmakológiai beavatkozás célpontjai lehetnek, és további vizsgálatokat igényelnek.
LÁTOGATÁSOK
Köszönetet szeretnénk mondani Dr. Miguel A. Celisnek a Tisné Kórházban, Dr. Leonardo Rodrígueznek a DIPRECA Kórházban és Dr. Cristian Cavallának, James Hamiltonnak és Gonzalo Wiedmaiernek a Padre Hurtado Kórházban a zsírszövet megszerzésében nyújtott felbecsülhetetlen segítségért, valamint Mrs. Marisol Blanco és Rodrigo Brücher úr technikai segítségéért.
TÁMOGATÁS
A DI-U de Chile (Mult 04/06-2 C. Rojasnak és 1-04/01-2 M. Cifuentesnek), valamint a FONDECYT (1070632 C. Rojasnak) támogatásával. Rojas, N°1080232 M. Cifuentesnek).
BLUHER M, WILSON-FRITCH L, LESZYK J, LAUSTSEN P G, COR VERA S, KAHN CR (2004) Role of insulin action and cell size on protein expression patterns in adipocytes. J Biol Chem 279: 31902-31909.
BRADFORD MM (1976) Gyors és érzékeny módszer mikrogrammnyi fehérje mennyiségi meghatározására a fehérje-festék kötődés elvének felhasználásával. Anal Biochem 72: 248-254.
CARPENÉ C (2001) Adrenerg receptorok vizsgálata, beleértve a lipolízis és a kötődés mérését. In: AILHAUD G (szerk.) Adipose Tissue Protocols. New Jersey: Humana Press. pp. 129-140.
DODT C, LONNROTH P, WELLHONER JP, FEHM HL, ELAM M (2003) A fehér zsírszövet szimpatikus kontrollja sovány és elhízott emberekben. Acta Physiol Scand 177: 351-357.
DOLÉ VP, MEINERTZ H (1960) A hosszú láncú zsírsavak mikrodeterminációja plazmában és szövetekben. J Biol Chem 235: 2595-2599.
GÓMEZ-AMBROSI J, CATALÁN V, DIEZ-CABALLERO A, MARTÍNEZ-CRUZ LA, GIL MJ, GARCÍA-FONCILLAS J, CIENFUEGOS JA, SALVADOR J, MATO JM, FRUHBECK G (2004) Gene expression profile of omental adipose tissue in human obesity. FASEB J 18: 215-217.
IMBEAULT P, LEMIEUX S, PRUDHOMME D, TREMBLAY A, NADEAU A, DESPRES JP, MAURIEGE P (1999) A zsigeri zsírszövet és a koszorúér-betegség metabolikus kockázati tényezőinek kapcsolata: hozzájárul-e a szubkután zsírsejtek hipertrófiája? Metabolism 48: 355-362.
JULIEN P, DESPRES JP, ÁNGEL A (1989) Scanning electrón microscopy of very small fat cells and mature fat cells in human obesity. J Lipid Res 30: 293-299.
KOZAK LP, JENSEN JT (1974) Genetic and developmental control of múltiple forms of L-glycerol 3-phosphate dehydrogenase. J Biol Chem 249: 7775-7781.
LANGIN D, DICKER A, TAVERNIER G, HOFFSTEDT J, MAIRAL A, RYDEN M, ARNER E, SICARD C, JENKINS M, VIGUERIE N, VAN HARMELEN V, GROSS RW, HOLM C, ARNER P (2005) Adipocyte Upases and defect of lipolysis in human obesity. Diabetes 54: 3190-3197.
LARGE V, REYNISDOTTIR S, LANGIN D, FREDBY K, KLANNEMARK M, HOLM C, ARNER P (1999) Az adipocita hormonérzékeny Upase csökkent expressziója és funkciója elhízott személyek szubkután zsírsejtjeiben. J Lipid Res 40: 2059-2066.
LE LAY S, KRIEF S, FARNIER C, LEFRERE I, LE LIEPVRE X, BAZIN R, FERRÉ P, DUGAIL I (2001) Koleszterin, egy sejtméretfüggő jel, amely szabályozza a glükóz anyagcserét és a génexpressziót a zsírsejtekben. J Biol Chem 276: 16904-16910.
LE LAY S, FERRÉ P, DUGAIL I (2004) Adipocyte cholesterol balance in obesity. Biochem Soc Trans 32: 103-106.
MOUSTAID N, JONES BH, TAYLOR JW (1996) Az inzulin növeli a lipogén enzimaktivitást humán adipocitákban primerkultúrában. J Nutr 126: 865-870.
NILSSON R, AHMAD F, SWARD K, ANDERSSON U, WESTON M, MANGANIELLO V, DEGERMAN E (2006) Plasma membrane cyclic nucleotide phosphodiesterase 3B (PDE3B) is associated with caveolae in primary adipocytes. Cell Signal 18: 1713-1721.
OLEFSKY JM (1977) A nagyméretű adipociták csökkent inzulinreakciójának mechanizmusai. Endocrinology 100: 1169-1177.
RODBELL M (1964) Izolált zsírsejtek anyagcseréje. I. Hormonok hatása a glükóz anyagcserére és a lipolízisre. J Biol Chem 239: 375-380.
RUMBERGER JM, WU T, HERING MA, MARSHALL S (2003) A hexozamin bioszintézis szerepe a lipogén enzimek mRNS levéinek glükóz által közvetített felszabályozásában: glükóz, glutamin és glükozamin hatása a glicerofoszfát dehidrogenáz, zsírsav szintáz és acetil-CoA karboxiláz mRNS levéire. J Biol Chem 278: 28547-28552.
SALANS LB, DOUGHERTY JW (1971): Az inzulin hatása a különböző méretű zsírsejtek glükóz anyagcseréjére A sejtek lipid- és fehérjetartalmának, életkorának és tápláltsági állapotának hatása. J Clin Invest 50: 1399-1410.
SALANS LB, CUSHMAN SW, WEISMANN RE (1973): Vizsgálatok az emberi zsírszöveten. A zsírsejtek mérete és száma nem elhízott és elhízott betegekben. J Clin Invest 52: 929-941.
SALANS SB, BRAY GA, CUSHMAN SW, DANFORTH JR E, GLENNON JA, HORTON ES, SIMS EA (1974) Glükóz anyagcsere és az emberi zsírszövet inzulinra adott válasza spontán és kísérleti elhízásban. Az étrend összetételének és a zsírsejtek méretének hatása. J Clin Invest 53: 848-856.
SMITH U (1971) A sejtméret hatása a humán zsírszövet lipidszintézisére in vitro. J Lipid Res 12: 65-70.
VAN HARMELEN V, SKURK T, ROHRIG K, LEE YM, HALBLEIB M, APRATH-HUSMANN I, WEYER C, FOLEY JE, BOGARDUS C, TATARANNI PA, PRATLEY RE (2000) Enlarged subcutan abdominal adipocyte size, but not obesity itself, predicts type II diabetes independent of insulin resistance. Diabetologia 43: 1498-1506.
VAN HARMELEN V, SKURK T, ROHRIG K, LEE YM, HALBLEIB M, APRATH-HUSMANN I, HAUNER H (2003) Effect of BMI and age on adipose tissue cellularity and differentiation capacity in women. Int J Obes Relat Metab Disord 27: 889-895.
YANG X, JANSSON PA, NAGAEV I, JACK MM, CARVALHO E, SUNNERHAGEN KS, CAM MC, CUSHMAN SW, SMITH U (2004) Evidence of impaired adipogenesis in insulin resistance. Biochem Biophys Res Commun 317: 1045-1051.