Esta es una preparación de Bacillus subtilis, teñida para demostrar las endosporas. Después de crecer en agar nutritivo a 37 grados Celsius durante 24 horas, los organismos se retiraron de la placa y se suspendieron en una gota de agua en un portaobjetos de vidrio. Se dejó que el agua se secara al aire y luego se fijaron las bacterias al portaobjetos pasándolas por la llama de un mechero Bunsen 3-4 veces. Se dejó enfriar el portaobjetos. Las endosporas se tiñeron con verde de malaquita al 5% inundando el portaobjetos con el tinte y colocando una llama bajo el portaobjetos hasta que la solución de tinte empezó a producir vapor. La solución de verde de malaquita calentada se dejó sobre las células durante 5 minutos. No fue necesario calentar continuamente el portaobjetos. El portaobjetos se enjuagó con agua del grifo y las células se contratinaron durante 30 segundos con Safranin O al 0,25% (la misma contratinción utilizada en la reacción de Gram). Tras completar el procedimiento de tinción, si las endosporas no son verdes, puede ser necesario modificar la técnica para incluir la vaporización continua con verde de malaquita durante 5 minutos. El tamaño medio de las células era de 3-5 micras.