Sporerfarve af Bacillus subtilis

Dette er et præparat af Bacillus subtilis, farvet for at påvise endosporer. Efter vækst på næringsstofagar ved 37 grader Celsius i 24 timer blev organismerne fjernet fra pladen og suspenderet i en dråbe vand på et objektglas. Vandet fik lov til at lufttørre, hvorefter bakterierne blev varmefikseret på objektglasset ved at lade det passere gennem flammen på en Bunsenbrænder 3-4 gange. Objektglasset fik lov til at afkøle. Endosporerne blev farvet med 5 % malakitgrønt ved at oversvømme objektglasset med farvestoffet og placere en flamme under objektglasset, indtil farveløsningen begyndte at producere damp. Den opvarmede malachitgrønne opløsning blev efterladt på cellerne i 5 minutter. Det var ikke nødvendigt at opvarme objektglasset kontinuerligt. Objektglasset blev skyllet med vandhanevand, og cellerne blev modfarvet i 30 sekunder med 0,25 % Safranin O (den samme modfarvning, der anvendes ved Gram-reaktionen). Hvis endosporerne efter farvningsproceduren ikke er grønne, kan det være nødvendigt at ændre teknikken, så den omfatter kontinuerlig dampning med malachitgrønt i 5 minutter, hvis endosporerne ikke er grønne. Den gennemsnitlige cellestørrelse var 3-5 mikron.

Skriv et svar

Din e-mailadresse vil ikke blive publiceret.