Indledning
Thalassæmi er den mest almindelige arvelige blodsygdom i Sydøstasien og skyldes nedsat eller manglende syntese af globinkæderne i hæmoglobin (Hb), hvilket fører til ubalance af globinkæderne.1,2 Beta-thalassæmi er en af hovedtyperne af thalassæmi og skyldes en mutation i beta-globin-genet (HBB) på kromosom 11. Det kliniske og hæmatologiske spektrum af beta-thalassæmi spænder fra tavse bærere til klinisk manifesterede tilstande, herunder alvorlig transfusionsafhængig beta-thalassæmi major og beta-thalassæmi intermedia (TI).3,4 I Thailand udgør både beta-thalassæmi og hæmoglobin E (HbE) en af de mest almindelige former, der er udbredt i alle regioner, især i det nordøstlige Thailand. De fleste af de alvorlige beta-thalassæmier skyldes interaktion mellem beta-thalassæmi og HbE.5,6
Det molekylære grundlag for thalassæmi er blevet undersøgt på verdensplan. Mere end 300 forskellige beta-globin-genmutationer er blevet karakteriseret. De fleste af beta-thalassemia-mutationerne skyldes punktmutationer, små deletioner eller insertioner inden for de kodende regioner og exon-intron-knudepunkterne. Mutationstyperne er typisk etniske specifikke.7-9 I Thailand varierer prævalensen af beta-thalassæmi-bærere fra 3 %-9 %.10 Indtil nu er der identificeret mere end 30 forskellige mutationer.11-13 Mutationernes heterogenitet gør det vanskeligt at identificere mutationen hos nogle beta-thalassæmipatienter. Forskellige DNA-analyseteknikker såsom dot blot-analyse, reverse dot blot, allelspecifik amplifikation ved hjælp af ARMS (amplification refractory mutation system) eller direkte DNA-sekventering er blevet anvendt i vid udstrækning til at identificere beta-globin-genmutationer14 .-17
Denne undersøgelse havde til formål at karakterisere beta-globin-genmutationerne hos 80 pædiatriske patienter, der bærer beta-thalassemia-mutationer, og som blev fulgt op på Phramongkutklao Hospital, et tertiært behandlingscenter for thalassemia-patienter fra alle regioner, især det centrale Thailand.
Patienter og metoder
Patientudvælgelse
O80 ubeslægtede beta-thalassemia-patienter, som deltog i hæmatologiklinikken på afdelingen for pædiatri, Phramongkutklao Hospital, Bangkok, Thailand, fra januar 2013 til december 2013, blev indskrevet i vores undersøgelse. Undersøgelsesprotokollen blev godkendt af Institutional Review Board of Phramongkutklao Hospital, Phramongkutklao College of Medicine, Thailand. Femogtres patienter havde klinisk manifesteret beta-thalassæmi, herunder 57 med beta-thalassæmi/HbE og otte med homozygot eller sammensat heterozygot beta-thalassæmi. Femten patienter havde heterozygot beta-thalassæmi. Alle patienterne blev diagnosticeret i en alder af 18 år eller yngre. Patienter med homozygot beta-thalassæmi og beta-thalassæmi/HbE blev klinisk klassificeret i svær transfusionsafhængig thalassæmi major og mild TI baseret på kriterier såsom alder ved præsentation, gennemsnitligt Hb-niveau ved steady state og transfusionsfrekvenshistorik, som tidligere beskrevet.18
Mutationsanalyse
Efter informeret samtykke blev der indsamlet i alt 80 perifere blodprøver af ethylendiamintetraeddikesyre (EDTA) fra alle individer. Genomisk DNA blev ekstraheret fra lymfocytter i perifert blod ved hjælp af et AxyPrep™ blodgenomisk DNA-miniprep-sæt i henhold til producentens protokol. Beta-globin-genmutationerne blev først karakteriseret ved hjælp af to sæt allelspecifikke polymerasekædereaktioner (PCR) eller multiplex amplifikationsrefraktær mutationssystem (M-ARMS) for at påvise syv almindelige mutationer i kinesiske og sydøstasiatiske befolkninger, herunder kodon 41/42 (-TCTT), codon 17 (A>T), nukleotid -28 (A>G), IVS-II-654 (C>T), codon 71/72 (+A), IVS-I-1 (G>T) og IVS-I-5 (G>C) som tidligere beskrevet.15,17 Disse mutationer har vist sig at være ansvarlige for 80-90 % af beta-thalassemia-allelerne i denne region19,20 . Ukendte beta-thalassæmiegener blev yderligere karakteriseret ved direkte DNA-sekventering af alle kodningsregioner og exon-introngrænser for at påvise ualmindelige punktmutationer og små rearrangementer i betaglobin-genet i henhold til protokoller, der tidligere er beskrevet andetsteds.16 Beta-thalassemia-alleler, der ikke blev karakteriseret ved ovennævnte M-ARMS- og DNA-sekventeringsmetoder, blev efterfølgende screenet ved gap-PCR for at påvise 3,4 kb deletion af hele beta-globin-genet, som tidligere er rapporteret i thailandske befolkninger.21
Resultater
I alt 88 beta-thalassemia-alleler fra otte homozygote eller sammensatte heterozygote beta-thalassemia-patienter, 57 beta-thalassemia/HbE-patienter og 15 heterozygote beta-thalassemia-patienter blev inkluderet i vores undersøgelse. Alle 80 forsøgspersoner var fra ubeslægtede familier, og 93,8 % (75/80) af forsøgspersonerne boede i Bangkok og andre provinser i det centrale Thailand. Af disse 65 patienter, der havde klinisk manifesteret beta-thalassæmi, præsenterede 92,3 % (60/65) og 7,7 % (5/65) af patienterne henholdsvis beta-thalassemia major og TI. Blandt de 60 beta-thalassemia major-patienter havde 86,7 % (52/60) af patienterne beta-thalassemia/HbE, mens kun 13,3 % (8/60) af patienterne havde homozygot eller sammensat heterozygot beta-thalassemia. Alternativt havde alle patienter med homozygot eller sammensat heterozygot beta-thalassæmi og 91,2 % (52/57) af beta-thalassæmi/HbE-patienterne i denne undersøgelse alvorlig transfusionsafhængig beta-thalassæmi major. Med hensyn til genotypen af beta-thalassemia major-patienterne var den mest almindelige genotype codon 41/42 (-TCTT)/codon 26 (G>A) eller betaE, der tegnede sig for 40 %, og den næstmest almindelige var codon 17 (A>T)/betaE, der tegnede sig for 18 %.3 % af alle beta-thalassemia major-genotyper (tabel 1 og figur 1).
  |
Tabel 1 Genotype af 65 klinisk manifesterede beta-thalassemia-patienter |
 |
Figur 1 Type af genotype hos beta-thalassæmi-patienter. |
For at klarlægge det molekylære grundlag for disse 88 beta-thalassemia-alleler karakteriserede vi først hver patients DNA ved hjælp af to sæt M-ARMS. Femoghalvfjerdsindstyve alleler (85,2 %) blev identificeret ved denne metode, herunder 33 alleler (37,5 %) af kodon 41/42 (-TCTT), 23 alleler (26.1 %) af codon 17 (A>T), syv alleler (8 %) af IVS-I-5 (G>C), seks alleler (6,8 %) af IVS-II-654 (C>T), fire alleler (4,5 %) af IVS-I-1 (G>T) og to alleler (2,3 %) af codon 71/72 (+A) (tabel 2). Det er interessant, at nukleotid -28 (A>G) ikke blev identificeret i vores undersøgelse. I 13 alleler (14,8 %) afslørede ingen af de to sæt beta-thalassæmi-mutationer. Direkte DNA-sekventering af alle tre kodende exoner og flankerende exon-intron-forbindelser i beta-globin-genet var således det næste skridt for at karakterisere disse 13 alleler. Der blev påvist seks ualmindelige mutationer i ni alleler (10,2 %), herunder fire alleler (4,5 %) for kodon 35 (C>A) og en allel (1,1 %) for henholdsvis initieringskodonmutation (ATG>AGG), kodon 15 (G>A), kodon 19 (A>G), kodon 27/28 (+C) og kodon 123/124/125 (-ACCCCACC) (figur 2). De resterende alleler, der ikke var karakteriseret ved M-ARMS og DNA-sekventering, blev yderligere identificeret ved gap-PCR for at påvise en 3,4 kb-deletion, og denne deletion blev fundet i alle fire resterende alleler (4,5 %).
 |
Tabel 2 Hyppigheden af beta-thalassemia-mutationer i 88 alleler |
 |
Figur 2 Seks ualmindelige mutationer identificeret ved direkte DNA-sekventering. |
I alt blev 100 % af vores 88 beta-thalassemia-alleler karakteriseret ved en kombination af disse teknikker, herunder to sæt M-ARMS, direkte DNA-sekventering og 3,4 kb-deletionsdetektion gap-PCR. Med undtagelse af betaE-globin-genet blev der i den foreliggende undersøgelse fundet 13 forskellige beta-thalassemia-mutationer. Deletionen på 4 bp (-TCTT) i kodon 41/42 var den mest almindelige mutation, der blev identificeret i vores undersøgelse, og den tegnede sig for 37,5 % af allelerne. Kodon 17 (A>T) var den næsthyppigste og tegnede sig for 26,1 % af allelerne. Tilsammen tegnede disse to almindelige mutationer sig for mere end halvdelen (63,6 %) af de berørte alleler. Alle andre almindelige mutationer undtagen nukleotid -28 (A>G) tegnede sig for 21,6 % af allelerne.
Diskussion
Denne undersøgelse gav nyttige oplysninger om frekvensfordelingen af beta-thalassæmimutationer blandt pædiatriske patienter, især i det centrale Thailand, da mere end 90 % af patienterne boede i Bangkok og andre provinser i denne region. I alt havde 92 % af de børn, der havde klinisk manifesteret beta-thalassæmi, beta-thalassæmi major-fænotypen, og mere end 85 % af de pædiatriske patienter med beta-thalassæmi major havde sammensat heterozygot beta-thalassæmi og HbE, som er meget udbredt i Thailand.5,6,8,10 Hyppigheden af betaE-globin-genet blev ikke medtaget i analysen af mutationsfrekvensen for beta-thalassæmi, da HbE let kan påvises ved Hb-elektroforese.
Flere metoder kan bestemme beta-thalassæmi-mutationer.14-17 Denne undersøgelse afslørede, at M-ARMS påviste syv almindelige mutationer i kinesiske og sydøstasiatiske populationer og kunne påvise 85,2 % af allelerne som i tidligere rapporter.19,20 Da M-ARMS kun kan påvise et givet sæt af mutationer, der er specifikke for de anvendte primere, er direkte DNA-sekventering det næste skridt til at identificere forskellige punktmutationer og små omlægninger i beta-globin-genet. Seks mindre hyppige mutationer blev identificeret i 10,2 % af allelerne. Ulempen ved DNA-sekventering er, at store deletioner i genet ikke kan påvises. Derfor er gap-PCR det sidste trin for at påvise 3,4 kb-deletion, som tidligere er rapporteret i thailandske befolkninger.21 En kombination af disse teknikker kunne identificere beta-thalassemia-mutationer i alle 88 alleler (100 %) hos pædiatriske patienter i vores undersøgelse.
Har man udelukket betaE-globin-genet, blev der påvist 13 forskellige beta-thalassemia-mutationer hos 80 ikke-forretningsmæssigt beslægtede patienter. De to mest almindelige påviste mutationer var codon 41/42 (-TCTT) og codon 17 (A>T), der tegnede sig for henholdsvis 37,5 % og 26,1 % af de berørte alleler. Alle andre almindelige mutationer, der blev påvist ved M-ARMS, tegnede sig for 21,6 % af allelerne. Sammenlignet med den tidligere undersøgelse af beta-thalassemia-mutationer i Thailand viste dette, at frekvensen af beta-globin-genmutationer, der blev identificeret i vores undersøgelse, var anderledes. For det første blev nukleotid -28 (A>G) ikke identificeret i vores undersøgelse. Nucleotid -28 (A>G) er en beta+-thalassemia-mutation, der forårsager den milde beta-thalassemia-fænotype; denne mutation er således kun blevet observeret hos TI-patienter.22 Den foreliggende undersøgelse viste, at TI var minoritetsgruppen (mindre end 10 %) blandt pædiatriske patienter med symptomatisk beta-thalassemia. Dette kan forklare, hvorfor denne mutation ikke blev observeret i vores undersøgelse. For det andet var frekvensen af andre almindelige mutationer, herunder kodon 41/42 (-TCTT), kodon 17 (A>T), IVS-II-654 (C>T), kodon 71/72 (+A), IVS-I-1 (G>T) og IVS-I-5 (G>C) i vores undersøgelse svarende til andre undersøgelser i det centrale Thailand.8,10 Allelfrekvensen i denne undersøgelse var imidlertid forskellig fra undersøgelser i andre dele af Thailand. Codon 41/42 (-TCTT) var den mest almindelige mutation, der blev identificeret i vores befolkning, som hovedsageligt boede i det centrale Thailand. Denne frameshift-mutation er også den mest almindelige mutation, der er fundet i de andre dele af Thailand, Folkerepublikken Kina og Sydøstasien.20 Mens codon 17 (A>T) var den næstmest almindelige muterede allel i det centrale, nordlige og nordøstlige Thailand, var IVS-I-5 (G>C) den næstmest almindelige i det sydlige Thailand.23 IVS-I-5 (G>C) blev tidligere rapporteret som den mest almindelige mutation blandt thailandske muslimske patienter i det sydlige Thailand.24 Derudover udgjorde codon 71/72 (+A) 2,3 % i den foreliggende undersøgelse, mens denne mutation udgjorde 6 % i det nordlige16 og 13,1 % i det nordøstlige13 Thailand, hvilket indikerer en højere frekvens af denne mutation i dette område.
Seks ualmindelige mutationer, herunder codon 35 (C>A), codon 15 (G>A), codon 19 (A>G) eller Hb Malay, codon 27/28 (+C), initiationskodonmutation (ATG>AGG) og codon 123/124/125 (-ACCCCACCACC) blev identificeret ved direkte DNA-sekventering. Selv om der ikke blev påvist nogen ny mutation, blev der i vores undersøgelse fundet to sjældne mutationer i Thailand, en initiationskodonmutation og en 8 bp-deletion i exon 3. Initiationskodonmutation (ATG>AGG) blev første gang beskrevet hos en kinesisk beta-thalassemia-patient i 1990.25 I Thailand blev denne mutation rapporteret én gang i 2005 hos to søskende med beta-thalassemia/HbE.26 Selv om denne mutation har alvorligt påvirket beta-globinkædesyntesen og højst sandsynligt forårsager beta0-thalassæmi-fænotype, havde alle tre rapporterede patienter den milde fænotype, hvilket kan forklares ved co-inheritering med heterozygot 3,7 kb deletion alfa-thal-2 genotype blandt den kinesiske patient og forbindelsen med C>T polymorfisme ved -158(G)gamma-globin-genet hos de to thailandske søskende. Vores patients fænotype var transfusionsafhængig beta-thalassemia major, diagnosticeret i en alder af 9 måneder, mens genotypen var sammensat heterozygot mellem kodon 41/42 (-TCTT) og initieringskodonmutation. Begge muterede alleler forårsager fænotypen beta0-thalassæmi. Ottebasedeletion i exon 3 eller codon 123/124/125 (-ACCCCCACC) blev først karakteriseret hos nordøstthailandske børn med den alvorlige beta-thalassæmi/HbE-fænotype.27 Denne deletion resulterer i syntesen af 135 aminosyrer betaX-kæden (beta-Khon Kaen), som er meget ustabile og nedbrydes kort efter translation. Omfattende ændring af aminosyrer ved kodon 123 til 131 forårsagede dominerende inklusionskropsbeta-thalassemia-træk som hos vores patient.
Beta-thalassemia/HbE er et stort thalassemia-problem i Thailand og kan være forbundet med forskellige kliniske fænotyper, der spænder fra mild thalassemia intermedia til svær transfusionsafhængig thalassemia major.5,6,8,10 Som i vores undersøgelse havde 85 % af beta-thalassemia major-patienterne og 100 % af TI-patienterne sammensatte heterozygote beta-thalassemia og HbE. Ved beta-thalassæmi major var den hyppigst forekommende genotype kodon 41/42 (-TCTT)/betaE (40 %), efterfulgt af kodon 17 (A>T)/betaE (18,3 %), IVS-I-5 (G>C)/betaE (8,3 %) og IVS-II-654 (C>T)/betaE (8,3 %), som udgjorde 75 % af alle påviste genotyper. Med undtagelse af betaE-thalassemia-mutationen blev alle beta-thalassemia-mutationer hos vores symptomatiske patienter klassificeret som beta0-mutationer med undtagelse af codon 19 (A>G) eller Hb Malay, der blev klassificeret som beta+-mutation og kun identificeret hos én patient.28
Interessant nok havde vores patient med codon 19 (A>G)/betaE transfusionsafhængig thalassemia major manifestation i stedet for mild TI. På den anden side manifesterede sammensatte heterozygoter blandt fire beta0-mutationer, herunder codon 41/42 (-TCTT), codon 17 (A>T), 3,4 kb-deletion, IVSI-1 (G>T) og betaE-genotypen sig som TI i stedet for beta-thalassemia major-fænotype. Dette fænomen kan forklares ved flere genetiske og ikke-genetiske faktorer, som kan spille en rolle for sygdommens variabilitet.5,22,29,30 Den yderligere genetiske analyse (genetiske modifikatorer) blev imidlertid ikke udført i vores undersøgelse.
Konceptet med præimplantationsgenetisk diagnose er at muliggøre overførsel af embryoner til livmoderen i assisterede reproduktionsprocedurer. Denne teknik er hurtig og egnet som et ikke-invasivt klinisk værktøj til identifikation af genetiske lidelser med henblik på at reducere selektive aborter som f.eks. thalassemia major.31,32 Vores undersøgelse afslørede forskellige beta-thalassemia-mutationer måske klinisk anvendt til præimplantationsgenetisk protokol, hvilket muliggør molekylærgenetisk analyse til at forstærke en specifik region på betaglobin-genet for et par.
Sammenfattende viser den foreliggende undersøgelse heterogeniteten af molekylære defekter, der forårsager beta-thalassemia hos thailandske børn. Alle beta-thalassemia-alleler er blevet karakteriseret ved en kombination af teknikker, herunder M-ARMS, direkte DNA-sekventering og gap-PCR til påvisning af 3,4 kb-deletion. Tretten mutationer tegnede sig for 100 % af beta-thalassemia-generne i vores undersøgelse. Den opnåede frekvens bør repræsentere frekvensen af beta-globin-genmutationer blandt pædiatriske patienter, som hovedsageligt boede i det centrale Thailand.
Anerkendelse
Denne undersøgelse blev godkendt af og modtog finansiering fra Phramongkutklao College of Medicine.
Oplysning
Forfatterne erklærer ingen interessekonflikter i forbindelse med dette arbejde.
|
Weatherall DJ. Thalassemia syndromerne. Tex Rep Biol Med. 1980;40:323-333. |
|
|
Vichinsky EP. Ændrende mønstre for thalassæmi på verdensplan. Ann N Y Acad Sci. 2005;1054:18-24. |
|
|
Cao A, Galanello R. Beta-thalassemia. Genet Med. 2010;12(2):61-76. |
|
|
Rund D, Rachmilewitz E. Beta-thalassemia. N Engl J Med. 2005; 353(11):1135-1146. |
|
|
Fucharoen S, Winichagoon P. Hæmoglobinopathies in southeast Asia. Indian J Med Res. 2011;134;134:498-506. |
|
|
Fucharoen S, Ketvichit P, Pootrakul P, Siritanaratkul N, Piankijagum A, Wasi P. Clinical manifestation of beta-thalassemia/hemoglobin E disease. J Pediatr Hematol Oncol. 2000;22(6):552-557. |
|
|
Akhavan-Niaki H, Derakhshandeh-Peykar P, Banihashemi A, et al. A comprehensive molecular characterization of beta thalassemia in a highly heterogeneous population. Blood Cells Mol Dis. 2011;47(1):29-32. |
|
|
Fucharoen S, Winichagoon P. Hemoglobinopathies in Southeast Asia: molecular biology and clinical medicine. Hæmoglobin. 1997;21(4): 299-319. |
|
|
Giardine B, van Baal S, Kaimakis P, et al. HbVar database over humane hæmoglobinvarianter og thalassemia-mutationer: 2007 opdatering. Hum Mutat. 2007;28(2):206. |
|
|
Wasi P, Pootrakul S, Pootrakul P, Pravatmuang P, Winichagoon P, Fucharoen S. Thalassemia in Thailand. Ann N Y Acad Sci. 1980;344: 352-363. |
|
|
Fukumaki Y, Fucharoen S, Fucharoen G, et al. Molekylær heterogenitet af beta-thalassæmi i Thailand. Southeast Asian J Trop Med Public Health. 1992;23 Suppl 2:14-21. |
|
|
Thein SL, Winichagoon P, Hesketh C, et al. The molecular basis of beta-thalassemia in Thailand: application to prenatal diagnosis. Am J Hum Genet. 1990;47(3):369-375. |
|
|
Fucharoen S, Fucharoen G, Sriroongrueng W, et al. Molekylært grundlag for beta-thalassemia i Thailand: analyse af beta-thalassemia-mutationer ved hjælp af polymerasekædereaktion. Hum Genet. 1989;84(1):41-46. |
|
|
Mirasena S, Shimbhu D, Sanguansermsri M, Sanguansermsri T. Påvisning af beta-thalassemia-mutationer ved hjælp af et multiplex amplifikationsrefraktært mutationssystemassay. Hæmoglobin. 2008;32(4):403-409. |
|
|
Bhardwaj U, Zhang YH, Lorey F, McCabe LL, McCabe ER. Molekylær genetisk konfirmatorisk testning af prøver fra screening af nyfødte for de almindelige afroamerikanske, asiatisk-indiske, sydøstasiatiske og kinesiske beta-thalassemia-mutationer. Am J Hematol. 2005;78(4):249-255. |
|
|
Sirichotiyakul S, Saetung R, Sanguansermsri T. Analyse af beta-thalassemia-mutationer i det nordlige Thailand ved hjælp af en automatiseret fluorescens-DNA-sekventeringsteknik. Hæmoglobin. 2003;27(2): 89-95. |
|
|
Fucharoen S, Fucharoen G, Ratanasiri T, Jetsrisuparb A, Fukumaki Y. En simpel ikke-radioaktiv metode til påvisning af beta-thalassemia/hbe-sygdom: anvendelse til prænatal diagnose. Southeast Asian J Trop Med Public Health. 1995;26 Suppl 1:278-281. |
|
|
Ho PJ, Hall GW, Luo LY, Weatherall DJ, Thein SL. Beta-thalassaemia intermedia: er det muligt konsekvent at forudsige fænotype ud fra genotype? Br J Haematol. 1998;100(1):70-78. |
|
|
Old JM, Khan SN, Verma I, et al. A multi-center study in order to further define the molecular basis of beta-thalassemia in Thailand, Pakistan, Sri Lanka, Mauritius, Syria, and India, and to develop a simple molecular diagnosis strategy by amplification refractory mutation system-polymerase chain reaction. Hæmoglobin. 2001;25(4):397-407. |
|
|
Kazazian HH Jr, Dowling CE, Waber PG, Huang S, Lo WH. Spektret af beta-thalassemia-gener i Kina og Sydøstasien. Blood. 1986;68(4):964-966. |
|
|
Sanguansermsri T, Pape M, Laig M, Hundrieser J, Flatz G. Beta zero-thalassemia in a Thai family is caused by a 3.4 kb deletion including the entire beta-globin gene. Hemoglobin. 1990;14(2):157-168. |
|
|
Nuntakarn L, Fucharoen S, Fucharoen G, Sanchaisuriya K, Jetsrisuparb A, Wiangnon S. Molekylære, hæmatologiske og kliniske aspekter af thalassemia major og thalassemia intermedia i forbindelse med Hb E-beta-thalassæmi i det nordøstlige Thailand. Blood Cells Mol Dis. 2009;42(1):32-35. |
|
|
Nopparatana C, Panich V, Saechan V, et al. Spektret af beta-thalassemia-mutationer i det sydlige Thailand. Southeast Asian J Trop Med Public Health. 1995;26 Suppl 1:229-234. |
|
|
Laosombat V, Nopparatana C, Wongchanchailert M, Wiriyasateinkul A. Molekylært grundlag for beta-thalassæmi hos thailandske muslimske patienter i det sydlige Thailand. Southeast Asian J Trop Med Public Health. 1997; 28 Suppl 3:104-105. |
|
|
Lam VM, Xie SS, Tam JW, Woo YK, Gu YL, Li AM. En ny enkelt nukleotidændring ved initieringskodonet (ATG—-AGG) identificeret i forstærket genomisk DNA fra en kinesisk beta-thalassemisk patient. Blood. 1990;75(5):1207-1208. |
|
|
Viprakasit V, Chinchang W, Suwanthol L, Tanphaichitr VS. Fælles oprindelse af en sjælden beta-globin-initieringskodonmutation (ATG–>AGG) hos asiater. Clin Lab Haematol. Dec 2005;27(6):409-415. |
|
|
Fucharoen G, Fuchareon S, Jetsrisuparb A, Fukumaki Y. Otte base-deletion i exon 3 af beta-globin-genet frembragte en ny variant (beta khon kaen) med et inklusionskropsbeta-thalassemia-træk. Blood. 1991;78(2):537-539. |
|
|
Yang KG, Kutlar F, George E, et al. Molekylær karakterisering af beta-globin-genmutationer hos malaysiske patienter med Hb E-beta-thalassæmi og thalassæmi major. Br J Haematol. 1989;72(1):73-80. |
|
|
Olivieri NF, Pakbaz Z, Vichinsky E. HbE/beta-thalassæmi: grundlaget for markant klinisk diversitet. Hematol Oncol Clin North Am. 2010;24(6): 1055-1070. |
|
|
Rund D, Fucharoen S. Genetiske modifikatorer i hæmoglobinopatier. Cur Mol Med. 2008;8(7):600-608. |
|
|
Nasri NW, Jamal AR, Abdullah NC, Razi ZR, Mokhtar NM. Præimplantationsgenetisk diagnose af beta-thalassæmi ved hjælp af enkeltcelle-DNA-analyse for codon 17 og 26 i beta-globin-genet. Arch Med Res. 2009;40(1):1-9. |
|
|
Hung CC, Chen SU, Lin SY, et al. Præimplantationsgenetisk diagnose af beta-thalassæmi ved hjælp af realtidspolymerasekædereaktion med fluorescensresonansenergioverførselssonder til hybridisering. Anal Biochem. 2010;400(1):69-77. |