Colorația sporilor de Bacillus subtilis

Acesta este un preparat de Bacillus subtilis, colorat pentru a evidenția endosporii. După creșterea pe agar nutritiv la 37 grade Celsius timp de 24 de ore, organismele au fost îndepărtate de pe placă și suspendate într-o picătură de apă pe o lamă de sticlă. Apa a fost lăsată să se usuce la aer și apoi bacteriile au fost fixate termic pe lamă prin trecerea acesteia prin flacăra unui arzător Bunsen de 3-4 ori. S-a lăsat lampa să se răcească. Endosporii au fost colorați cu 5 % verde de malachit prin inundarea lamei cu colorant și plasarea unei flăcări sub lamă până când soluția de colorare a început să producă aburi. Soluția încălzită de verde de malachit a fost lăsată pe celule timp de 5 minute. Nu a fost necesară încălzirea continuă a lamei cu abur (încălzire). Lamela a fost clătită cu apă de la robinet, iar celulele au fost contracolorate timp de 30 de secunde cu 0,25 % Safranin O (același contracolor utilizat în reacția Gram). După finalizarea procedurii de colorare, în cazul în care endosporii nu sunt verzi, poate fi necesară modificarea tehnicii pentru a include aburirea continuă cu verde de malachit timp de 5 minute. Dimensiunea medie a celulelor a fost de 3-5 microni.

.

Lasă un răspuns

Adresa ta de email nu va fi publicată.