Introducere
Talaasemia este cea mai frecventă afecțiune ereditară a sângelui în Asia de Sud-Est și este cauzată de sinteza redusă sau absentă a lanțurilor globinice ale hemoglobinei (Hb), ceea ce duce la un dezechilibru al lanțurilor globinice.1,2 Beta-talasemia este unul dintre tipurile majore de talasemie și este cauzată de o mutație în gena beta-globinei (HBB) de pe cromozomul 11. Spectrul clinic și hematologic al beta-talasemiei variază de la purtător silențios până la afecțiuni manifestate clinic, inclusiv beta-talasemia majoră severă dependentă de transfuzii și beta-talasemia intermedia (TI).3,4 În Thailanda, atât beta-talasemia, cât și hemoglobina E (HbE) reprezintă una dintre cele mai frecvente forme distribuite în toate regiunile, în special în nord-estul Thailandei. Cea mai mare parte a beta-talasemiei severe rezultă din interacțiunea dintre beta-talasemie și HbE.5,6
Baza moleculară a talasemiei a fost studiată în întreaga lume. Au fost caracterizate mai mult de 300 de mutații diferite ale genei beta-globinei. Cele mai multe dintre mutațiile beta-talasemiei sunt cauzate de mutații punctiforme, mici deleții sau inserții în cadrul regiunilor codificatoare și al joncțiunilor exon-intron. Tipurile de mutație sunt de obicei specifice unei etnii.7-9 În Thailanda, prevalența purtătorilor de beta-talasemie variază între 3%-9%.10 Până în prezent, au fost identificate peste 30 de mutații diferite.11-13 Eterogenitatea mutațiilor face dificilă identificarea mutației la unii pacienți cu beta-talasemie. Diferite tehnici de analiză a ADN, cum ar fi analiza dot blot, reverse dot blot, amplificarea specifică alelei cu ajutorul sistemului de mutații refractare la amplificare (ARMS) sau secvențierea directă a ADN-ului au fost utilizate pe scară largă pentru a identifica mutațiile genei beta-globinei.14-17
Acest studiu a avut ca scop caracterizarea mutațiilor genei beta-globinei la 80 de pacienți pediatrici purtători de mutații ale genei beta-talasemiei și care au fost urmăriți la Spitalul Phramongkutklao, un centru de îngrijire terțiară pentru pacienții cu talasemie din toate regiunile, în special din centrul Thailandei.
Pacienți și metode
Selecția pacienților
Optzeci de pacienți beta-talasemici neînrudiți care au frecventat Clinica de hematologie din cadrul Departamentului de Pediatrie, Spitalul Phramongkutklao, Bangkok, Thailanda, din ianuarie 2013 până în decembrie 2013, au fost înscriși în studiul nostru. Protocolul studiului a fost aprobat de către Comitetul de evaluare instituțională al Spitalului Phramongkutklao, Colegiul de Medicină Phramongkutklao, Thailanda. Șaizeci și cinci de pacienți aveau beta-talasemie manifestată clinic, inclusiv 57 cu beta-talasemie/HbE și opt cu beta-talasemie homozigotă sau heterozigotă compusă. Cincisprezece pacienți aveau beta-talasemie heterozigotă. Toți pacienții au fost diagnosticați la vârsta de 18 ani sau mai puțin. Pacienții cu beta-talasemie homozigotă și beta-talasemie/HbE au fost clasificați clinic în talasemie majoră severă dependentă de transfuzii și TI ușoară pe baza unor criterii precum vârsta la prezentare, nivelul mediu de Hb la starea de echilibru și istoricul frecvenței transfuziilor, așa cum a fost descris anterior.18
Analiză de mutații
După obținerea consimțământului în cunoștință de cauză, au fost recoltate un total de 80 de probe de acid etilendiaminotetraacetic (EDTA) din sângele periferic de la toți indivizii. ADN genomic a fost extras din limfocitele din sângele periferic cu ajutorul unui kit de minipreluare a ADN-ului genomic din sânge AxyPrep™ în conformitate cu protocolul producătorului. Mutațiile genei beta-globinei au fost mai întâi caracterizate folosind două seturi de reacție în lanț a polimerazei (PCR) specifice alelei sau sistemul de mutații refractare la amplificare multiplexă (M-ARMS) pentru a detecta șapte mutații comune în populațiile chineze și din Asia de Sud-Est, inclusiv codonul 41/42 (-TCTT), codonul 17 (A>T), nucleotidul -28 (A>G), IVS-II-654 (C>T), codonul 71/72 (+A), IVS-I-1 (G>T) și IVS-I-5 (G>C), așa cum a fost descris anterior.15,17 S-a constatat că aceste mutații sunt responsabile pentru 80%-90% din alelele beta-talasemiei în această regiune.19,20 Genele necunoscute ale beta-talasemiei au fost caracterizate în continuare prin secvențierea directă a ADN-ului din toate regiunile codificatoare și limitele exon-intron pentru a detecta mutații punctiforme neobișnuite și rearanjamente mici în gena beta-globinei în conformitate cu protocoalele descrise anterior în altă parte.16 Alelele beta-talasemiei care au rămas necaracterizate prin metodele M-ARMS și de secvențiere a ADN de mai sus au fost ulterior examinate prin gap-PCR pentru a detecta deleția de 3,4 kb a întregii gene beta-globină, raportată anterior la populațiile thailandeze.21
Rezultate
Un total de 88 de alele de beta-talasemie de la opt pacienți cu beta-talasemie homozigoți sau heterozigoți compuși, 57 de pacienți cu beta-talasemie/HbE și 15 persoane cu beta-talasemie heterozigoți au fost incluse în studiul nostru. Toți cei 80 de subiecți proveneau din familii neînrudite și 93,8% (75/80) dintre subiecți locuiau în Bangkok și în alte provincii din centrul Thailandei. Dintre acești 65 de pacienți care au avut o beta-talasemie manifestată clinic, 92,3% (60/65) și 7,7% (5/65) dintre pacienți au prezentat beta-talasemie majoră și, respectiv, TI. La cei 60 de pacienți cu beta-talasemie majoră, 86,7% (52/60) dintre pacienți aveau beta-talasemie/HbE, în timp ce doar 13,3% (8/60) dintre pacienți aveau beta-talasemie homozigotă sau heterozigotă compusă. Alternativ, toți pacienții cu beta-talasemie homozigotă sau heterozigotă compusă și 91,2% (52/57) dintre pacienții cu beta-talasemie/HbE din acest studiu au prezentat o beta-talasemie majoră severă dependentă de transfuzii. În ceea ce privește genotipul pacienților cu beta-talasemie majoră, cel mai frecvent genotip a fost codonul 41/42 (-TCTT)/codonul 26 (G>A) sau betaE, reprezentând 40%, iar al doilea cel mai frecvent a fost codonul 17 (A>T)/betaE, reprezentând 18.3% din toate genotipurile beta-talasemiei majore (tabelul 1 și figura 1).
  |
Tabel 1 Genotipul a 65 de pacienți cu beta-talasemie cu manifestări clinice |
 |
Figura 1 Tipul de genotip la pacienții cu beta-talasemie. |
Pentru a elucida baza moleculară a acestor 88 de alele beta-talasemice, am caracterizat mai întâi ADN-ul fiecărui pacient prin două seturi de M-ARMS. Șaptezeci și cinci de alele (85,2%) au fost identificate prin această metodă, inclusiv 33 de alele (37,5%) de codon 41/42 (-TCTT), 23 de alele (26.1%) ale codonului 17 (A>T), șapte alele (8%) ale IVS-I-5 (G>C), șase alele (6,8%) ale IVS-II-654 (C>T), patru alele (4,5%) ale IVS-I-1 (G>T) și două alele (2,3%) ale codonului 71/72 (+A) (tabelul 2) (tabelul 2). În mod interesant, nucleotidul -28 (A>G) nu a fost identificat în studiul nostru. La 13 alele (14,8%), niciun set nu a dezvăluit mutația beta-talasemică. Astfel, secvențierea directă a ADN-ului tuturor celor trei exoni codificatori și a joncțiunilor exon-intron flancate în gena beta-globinei a fost următorul pas pentru a caracteriza aceste 13 alele. Șase mutații neobișnuite au fost detectate în nouă alele (10,2 %), inclusiv patru alele (4,5 %) ale codonului 35 (C>A) și o alelă (1,1 %) pentru mutația codonului de inițiere (ATG>AGG), codonul 15 (G>A), codonul 19 (A>G), codonul 27/28 (+C) și, respectiv, codonul 123/124/125 (-ACCCCACC) (Figura 2). Alelele rămase, necaracterizate prin M-ARMS și secvențierea ADN, au fost identificate ulterior prin gap-PCR pentru a detecta o deleție de 3,4 kb, iar această deleție a fost găsită în toate cele patru alele rămase (4,5%).
 |
Tabel 2 Frecvența mutațiilor beta-talasemiei în 88 de alele |
 |
Figura 2 Șase mutații neobișnuite identificate prin secvențiere directă a ADN. |
În total, 100% din cele 88 de alele beta-talasemice ale noastre au fost caracterizate printr-o combinație a acestor tehnici, inclusiv două seturi de M-ARMS, secvențiere directă a ADN-ului și gap-PCR de detectare a deleției de 3,4 kb. Excluzând gena betaE-globinei, în cadrul prezentului studiu au fost întâlnite 13 mutații diferite ale beta-talasemiei. Deleția de 4 pb (-TCTT) în codonii 41/42 a fost cea mai frecventă mutație identificată în studiul nostru și a reprezentat 37,5% din alele. Mutația codonului 17 (A>T) a fost a doua cea mai frecventă și a reprezentat 26,1% din alele. Împreună, aceste două mutații comune au reprezentat mai mult de jumătate (63,6%) din alelele afectate. Toate celelalte mutații comune, cu excepția nucleotidului -28 (A>G), au reprezentat 21,6% din alele.
Discuție
Acest studiu a furnizat informații utile cu privire la distribuția frecvenței mutațiilor beta-talasemiei în rândul pacienților pediatrici, în special în centrul Thailandei, deoarece mai mult de 90% dintre pacienți locuiau în Bangkok și în alte provincii din această regiune. În total, 92% dintre copiii care aveau beta-talasemie manifestată clinic aveau fenotipul beta-talasemiei majore și mai mult de 85% dintre pacienții pediatrici cu beta-talasemie majoră aveau beta-talasemie heterozigotă compusă și HbE, care este foarte răspândită în Thailanda.5,6,6,8,10 Frecvența genei betaE-globinei nu a fost inclusă în analiza frecvenței mutațiilor beta-talasemiei, deoarece HbE poate fi ușor detectată prin electroforeza Hb.
Diverse metode pot determina mutațiile beta-talasemiei.14-17 Acest studiu a arătat că M-ARMS a detectat șapte mutații comune în populațiile chineze și din Asia de sud-est și a fost capabil să detecteze 85,2% din alele, la fel ca în rapoartele anterioare.19,20 Deoarece M-ARMS poate detecta doar un anumit set de mutații specifice amorselor utilizate, secvențierea directă a ADN-ului este următorul pas pentru a identifica diverse mutații punctiforme și rearanjamente mici în gena beta-globinei. Șase mutații mai puțin frecvente au fost identificate în 10,2 % din alele. Dezavantajul secvențierii ADN este că delețiile mari ale genei sunt nedetectabile. Astfel, gap-PCR este pasul final pentru a detecta deleția de 3,4 kb, raportată anterior la populațiile thailandeze.21 O combinație a acestor tehnici a putut identifica mutațiile beta-talasemiei în toate cele 88 de alele (100%) ale pacienților pediatrici din studiul nostru.
Excluzând gena betaE-globinei, au fost detectate 13 mutații diferite ale beta-talasemiei la 80 de pacienți neînrudiți. Cele mai frecvente două mutații detectate au fost codonul 41/42 (-TCTT) și codonul 17 (A>T), reprezentând 37,5% și, respectiv, 26,1% din alelele afectate. Toate celelalte mutații comune detectate de M-ARMS au reprezentat 21,6% din alele. În comparație cu studiul anterior privind mutațiile beta-talasemiei în Thailanda, acest lucru a arătat că frecvența mutațiilor genei beta-globinei identificate în studiul nostru a fost diferită. În primul rând, nucleotidul -28 (A>G) nu a fost identificat în studiul nostru. Nucleotida -28 (A>G) este o mutație beta+-talasemică ce cauzează fenotipul beta-talasemiei ușoare; astfel, această mutație a fost observată doar la pacienții cu TI.22 Acest studiu de față a demonstrat că TI a fost grupul minoritar (mai puțin de 10%) în rândul pacienților pediatrici cu beta-talasemie simptomatică. Acest lucru poate explica de ce această mutație nu a fost observată în studiul nostru. În al doilea rând, frecvența altor mutații comune, inclusiv a codonului 41/42 (-TCTT), codonului 17 (A>T), IVS-II-654 (C>T), codonului 71/72 (+A), IVS-I-1 (G>T) și IVS-I-5 (G>C) în studiul nostru a fost similară cu alte studii din centrul Thailandei.8,10 Cu toate acestea, frecvența alelei din acest studiu de față a fost diferită de studiile din alte părți ale Thailandei. Codonul 41/42 (-TCTT) a fost cea mai frecventă mutație identificată în populația noastră, care a trăit în principal în centrul Thailandei. Această mutație frameshift este, de asemenea, cea mai frecventă mutație găsită în alte părți ale Thailandei, în Republica Populară Chineză și în Asia de Sud-Est.20 În timp ce codonul 17 (A>T) a fost a doua cea mai frecventă alelă mutantă în centrul, nordul și nord-estul Thailandei, IVS-I-5 (G>C) a fost a doua cea mai frecventă în sudul Thailandei.23 IVS-I-5 (G>C) a fost raportat anterior ca fiind cea mai frecventă mutație în rândul pacienților musulmani thailandezi din sudul Thailandei.24 În plus, codonul 71/72 (+A) a reprezentat 2,3% în studiul de față, în timp ce această mutație a reprezentat 6% în nordul16 și 13,1% în nord-estul13 Thailandei, ceea ce indică o frecvență mai mare a acestei mutații în această zonă.
Sase mutații neobișnuite, inclusiv codonul 35 (C>A), codonul 15 (G>A), codonul 19 (A>G) sau Hb Malay, codonul 27/28 (+C), mutația codonului de inițiere (ATG>AGG) și codonul 123/124/125 (-ACCCCACC) au fost identificate prin secvențierea directă a ADN. Deși nu a fost detectată nicio mutație nouă, în studiul nostru au fost găsite două mutații rare în Thailanda, mutația codonului de inițiere și o deleție de 8 pb în exonul 3. Mutația codonului de inițiere (ATG>AGG) a fost descrisă pentru prima dată la un pacient chinez cu beta-talasemie în 1990.25 În Thailanda, această mutație a fost raportată o singură dată în 2005 la doi frați cu beta-talasemie/HbE.26 Deși această mutație a afectat grav sinteza lanțului beta-globinei și cel mai probabil cauzează fenotipul beta0-talasemiei, toți cei trei pacienți raportați au avut fenotipul ușor, ceea ce poate fi explicat prin coerederea cu genotipul alfa-thal-2 cu deleție heterozigotă de 3,7 kb în cazul pacientului chinez și asocierea cu polimorfismul C>T la gena gamma-globinei -158(G)- la cei doi frați thailandezi. Fenotipul pacientului nostru a fost beta-talasemia majoră dependentă de transfuzii, diagnosticată la vârsta de 9 luni, în timp ce genotipul a fost heterozigotă compusă între codonul 41/42 (-TCTT) și mutația codonului de inițiere. Ambele alele mutante cauzează fenotipul beta0-talasemiei. O deleție de opt baze în exonul 3 sau în codonul 123/124/125 (-ACCCCACC) a fost caracterizată pentru prima dată la copiii din nord-estul Thailandei cu fenotip beta-talasemie/HbE severă.27 Această deleție are ca rezultat sinteza a 135 de aminoacizi din lanțul betaX (beta-Khon Kaen), care sunt foarte instabili și degradați la scurt timp după traducere. Alterarea extensivă a aminoacizilor la nivelul codonului 123-131 a cauzat trăsături dominante de beta-talasemie cu corp de incluziune, ca la pacientul nostru.
Beta-talasemia/HbE este o problemă majoră a talasemiei în Thailanda și poate fi asociată cu diverse fenotipuri clinice, de la talasemia ușoară intermedia până la talasemia majoră severă dependentă de transfuzii.5,6,8,10 Ca și în studiul nostru, 85% dintre pacienții cu beta-talasemie majoră și 100% dintre pacienții cu TI aveau beta-talasemie și HbE heterozigotă compusă. În cazul beta-talasemiei majore, cel mai des întâlnit genotip a fost codonul 41/42 (-TCTT)/betaE (40%), urmat de codonul 17 (A>T)/betaE (18,3%), IVS-I-5 (G>C)/betaE (8,3%) și IVS-II-654 (C>T)/betaE (8,3%), care au reprezentat 75% din toate genotipurile detectate. Cu excepția mutației betaE-talasemiei, toate mutațiile beta-talasemiei la pacienții noștri simptomatici au fost clasificate ca mutație beta0, cu excepția codonului 19 (A>G) sau Hb Malay, clasificat ca mutație beta+ și identificat doar la un singur pacient.28
Este interesant faptul că pacientul nostru cu codon 19 (A>G)/betaE a avut o manifestare de talasemie majoră dependentă de transfuzii în loc de TI ușoară. Pe de altă parte, heterozigoții compuși între patru mutații beta0, inclusiv codonul 41/42 (-TCTT), codonul 17 (A>T), deleția de 3,4 kb, IVSI-1 (G>T) și genotipul betaE au manifestat TI în loc de fenotip de beta-talasemie majoră. Acest fenomen poate fi explicat prin mai mulți factori genetici și nongenetici, care pot juca roluri în determinarea variabilității bolii.5,22,29,30 Cu toate acestea, analiza genetică suplimentară (modificatori genetici) nu a fost efectuată în studiul nostru.
Conceptul diagnosticului genetic preimplantațional este acela de a permite transferul embrionilor în uter în cadrul procedurilor de reproducere asistată. Această tehnică este rapidă și potrivită ca instrument clinic neinvaziv pentru identificarea tulburărilor genetice în scopul reducerii avorturilor selective, cum ar fi talasemia majoră.31,32 Studiul nostru a relevat diferite mutații beta-talasemice poate aplicate clinic la protocolul genetic de preimplantare, permițând analiza genetică moleculară pentru a amplifica o regiune specifică pe gena beta-globinei pentru un cuplu.
În concluzie, studiul de față demonstrează eterogenitatea defectelor moleculare care cauzează beta-talasemia la copiii thailandezi. Toate alelele beta-talasemiei au fost caracterizate printr-o combinație de tehnici, inclusiv M-ARMS, secvențierea directă a ADN-ului și gap-PCR pentru detectarea deleției de 3,4 kb. Treisprezece mutații au reprezentat 100% din genele beta-talasemiei în studiul nostru. Frecvența obținută ar trebui să reprezinte frecvența mutațiilor genei beta-globinei în rândul pacienților pediatrici, care au trăit în principal în centrul Thailandei.
Recunoaștere
Acest studiu a fost aprobat de și a primit finanțare de la Phramongkutklao College of Medicine.
Dezvăluiri
Autorii declară că nu există conflicte de interese în această lucrare.
|
Weatherall DJ. Sindroamele talasemice. Tex Rep Biol Med. 1980;40:323-333. |
|
|
Vichinsky EP. Schimbarea modelelor de talasemie la nivel mondial. Ann N Y Acad Sci. 2005;1054:18-24. |
|
|
Cao A, Galanello R. Beta-talasemia. Genet Med. 2010;12(2):61-76. |
|
|
Rund D, Rachmilewitz E. Beta-talasemia. N Engl J Med. 2005; 353(11):1135-1146. |
|
|
Fucharoen S, Winichagoon P. Hemoglobinopatii în Asia de sud-est. Indian J Med Res. 2011;134:498-506. |
|
|
Fucharoen S, Ketvichit P, Pootrakul P, Siritanaratkul N, Piankijagum A, Wasi P. Clinical manifestation of beta-thalassemia/hemoglobin E disease. J Pediatr Hematol Oncol. 2000;22(6):552-557. |
|
|
Akhavan-Niaki H, Derakhshandeh-Peykar P, Banihashemi A, et al. A comprehensive molecular characterization of beta thalassemia in a highly heterogeneous population. Blood Cells Mol Dis. 2011;47(1):29-32. |
|
|
Fucharoen S, Winichagoon P. Hemoglobinopatii în Asia de Sud-Est: biologie moleculară și medicină clinică. Hemoglobină. 1997;21(4): 299-319. |
|
|
Giardine B, van Baal S, Kaimakis P, et al. HbVar database of human hemoglobin variants and thalassemia mutations: Actualizare 2007. Hum Mutat. 2007;28(2):206. |
|
|
Wasi P, Pootrakul S, Pootrakul P, Pravatmuang P, Winichagoon P, Fucharoen S. Thalassemia in Thailand. Ann N Y Acad Sci. 1980;344: 352-363. |
|
|
Fukumaki Y, Fucharoen S, Fucharoen G, et al. Molecular heterogeneity of beta-thalassemia in Thailand. Southeast Asian J Trop Med Public Health. 1992;23 Suppl 2:14-21. |
|
|
Thein SL, Winichagoon P, Hesketh C, et al. The molecular basis of beta-thalassemia in Thailand: application to prenatal diagnosis. Am J Hum Genet. 1990;47(3):369-375. |
|
|
Fucharoen S, Fucharoen G, Sriroongrueng W, et al. Molecular basis of beta-thalassemia in Thailand: analysis of beta-thalassemia mutations using the polymerase chain reaction (Baza moleculară a beta-talasemiei în Thailanda: analiza mutațiilor beta-talasemiei cu ajutorul reacției în lanț a polimerazei). Hum Genet. 1989;84(1):41-46. |
|
|
Mirasena S, Shimbhu D, Sanguansermsri M, Sanguansermsri T. Detectarea mutațiilor beta-talasemiei folosind un test de amplificare multiplexă a sistemului de mutații refractare la amplificare. Hemoglobină. 2008;32(4):403-409. |
|
|
Bhardwaj U, Zhang YH, Lorey F, McCabe LL, McCabe ER. Testarea de confirmare genetică moleculară din probele de screening pentru nou-născuți pentru mutațiile comune ale beta-talasemiei afro-americane, indiene asiatice, asiatice de sud-est și chinezești. Am J Hematol. 2005;78(4):249-255. |
|
|
Sirichotiyakul S, Saetung R, Sanguansermsri T. Analysis of beta-thalassemia mutations in northern Thailand using an automated fluorescence DNA sequencing technique. Hemoglobină. 2003;27(2): 89-95. |
|
|
Fucharoen S, Fucharoen G, Ratanasiri T, Jetsrisuparb A, Fukumaki Y. O metodă simplă non-radioactivă pentru detectarea bolii beta-talasemiei/hbe: aplicație la diagnosticul prenatal. Southeast Asian J Trop Med Public Health. 1995;26 Suppl 1:278-281. |
|
|
Ho PJ, Hall GW, Luo LY, Weatherall DJ, Thein SL. Beta-talasemia intermedia: este posibil să se prezică în mod consecvent fenotipul din genotip? Br J Haematol. 1998;100(1):70-78. |
|
|
Old JM, Khan SN, Verma I, et al. A multi-center study in order to further define the molecular basis of beta-thalassemia in Thailand, Pakistan, Sri Lanka, Mauritius, Syria, and India, and to develop a simple molecular diagnostic strategy by amplification refractory mutation system-polymerase chain reaction. Hemoglobina. 2001;25(4):397-407. |
|
|
Kazazian HH Jr, Dowling CE, Waber PG, Huang S, Lo WH. Spectrul genelor beta-talasemiei în China și Asia de Sud-Est. Sânge. 1986;68(4):964-966. |
|
|
Sanguansermsri T, Pape M, Laig M, Hungrieser J, Flatz G. Beta zero-talasemia într-o familie thailandeză este cauzată de o deleție de 3,4 kb care include întreaga genă beta-globină. Hemoglobină. 1990;14(2):157-168. |
|
|
Nuntakarn L, Fucharoen S, Fucharoen G, Sanchaisuriya K, Jetsrisuparb A, Wiangnon S. Aspecte moleculare, hematologice și clinice ale talasemiei majore și talasemiei intermediare asociate cu Hb E-beta-talasemie în nord-estul Thailandei. Blood Cells Mol Dis. 2009;42(1):32-35. |
|
|
Nopparatana C, Panich V, Saechan V, et al. The spectrum of beta-thalassemia mutations in southern Thailand. Southeast Asian J Trop Med Public Health. 1995;26 Suppl 1:229-234. |
|
|
Laosombat V, Nopparatana C, Wongchanchailert M, Wiriyasateinkul A. Molecular basis of beta-thalassemia in Thai Muslim patients in the south of Thailand. Southeast Asian J Trop Med Public Health. 1997; 28 Suppl 3:104-105. |
|
|
Lam VM, Xie SS, Tam JW, Woo YK, Gu YL, Li AM. O nouă modificare nucleotidică unică la nivelul codonului de inițiere (ATG—-AGG) identificată în ADN genomic amplificat al unui pacient chinez beta-talasemic. Sânge. 1990;75(5):1207-1208. |
|
|
Viprakasit V, Chinchang W, Suwanthol L, Tanphaichitr VS. Originea comună a unei mutații rare a codonului de inițiere a beta-globinei (ATG–>AGG) la asiatici. Clin Lab Haematol. Dec 2005;27(6):409-415. |
|
|
Fucharoen G, Fuchareon S, Jetsrisuparb A, Fukumaki Y. O deleție de opt baze în exonul 3 al genei beta-globinei a produs o nouă variantă (beta khon kaen) cu o trăsătură de beta-talasemie cu corp de incluziune. Sânge. 1991;78(2):537-539. |
|
|
Yang KG, Kutlar F, George E, et al. Molecular characterization of beta-globin gene mutations in Malay patients with Hb E-beta-thalassaemia and thalassaemia major. Br J Haematol. 1989;72(1):73-80. |
|
|
Olivieri NF, Pakbaz Z, Vichinsky E. HbE/beta-talasemie: baza diversității clinice marcate. Hematol Oncol Clin North Am. 2010;24(6): 1055-1070. |
|
|
Rund D, Fucharoen S. Genetic modifiers in hemoglobinopathies. Cur Mol Med. 2008;8(7):600-608. |
|
|
Nasri NW, Jamal AR, Abdullah NC, Razi ZR, Mokhtar NM. Diagnosticul genetic preimplantațional pentru beta-talasemie utilizând analiza ADN monocelular pentru codonii 17 și 26 ai genei beta-globinei. Arch Med Res. 2009;40(1):1-9. |
|
|
Hung CC, Chen SU, Lin SY, et al. Preimplantation genetic diagnosis of beta-thalassemia using real-time polymerase chain reaction with fluorescence resonance energy transfer hybridization probes. Anal Biochem. 2010;400(1):69-77. |