Esta é uma preparação de Bacillus subtilis, corada para demonstrar endosporos. Após crescimento em ágar nutriente a 37 graus Celsius por 24 horas, os organismos foram removidos da placa e suspensos em uma gota de água em uma lâmina de vidro. A água foi deixada secar ao ar e, em seguida, as bactérias foram fixadas ao calor da lâmina, passando-a através da chama de um queimador de Bunsen 3-4 vezes. A lâmina foi autorizada a arrefecer. Os endosporos foram corados com 5% de verde malaquite, inundando a lâmina com mancha e colocando uma chama sob a lâmina até que a solução da mancha começasse a produzir vapor. A solução verde de Malaquite aquecida foi deixada sobre as células por 5 minutos. A vaporização (aquecimento) contínua da lâmina não foi necessária. A lâmina foi lavada com água da torneira e as células foram contra-manchadas por 30 segundos com 0,25% de Safranina O (a mesma contra-mancha usada na reação de Gram). Após completar o procedimento de coloração, se os endosporos não estiverem verdes, pode ser necessário modificar a técnica para incluir vaporização contínua com verde malaquita durante 5 minutos. O tamanho médio das células foi de 3-5 microns.